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大肠实验步骤(—)培养基1、普通乳糖蛋白胨培养液亚硫酸钠培养基（供平板分离用）蛋白胨 10g， 乳糖 10g，K2HPO4 3.5g，琼脂 15～20g，蒸馏水1000mL，无水亚硫酸钠 5g，5％的碱性品红乙醇溶液 20mL，pH 7.2~7.4。4、培养基（EMB培养基）（供发酵法平板分离用，3和4可任选一种）蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2.0g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，2％伊红（曙红）水溶液 20mL，5％美蓝（亚甲蓝）水溶液13mL，pH 7.2~7.4。(二)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染色液、灭菌培养皿。(一)水样的采集供细菌学检验的水样，必须按一般无菌操作的基本要求采集，并保证再运送、贮存过程中不受污染。水样从采集到检验不应超过4h ，在0～4℃下保存不应超过24h ，如不能在4h 内分析，应在检验报告上注明保存时间和条件。1、自来水取样：应在水打开放水5min ，再用无菌容器接取水样，待分析。如水样内含有余氯，则采样瓶灭菌后按每500mL水样加3％Na2S2O3.5H2O溶液1mL。2、江、河、湖、池自然水体取样：可用采样器，采样瓶应先灭菌。采样后，瓶内应留有空隙。如果与其他化验项目联合取样，细菌学分析水样应采在其他样品之前。
地表水中快速检测粪大肠菌群的方法
想要知道地表水是否受到了粪水污染以及污染的程度如何，粪大肠菌群是一项非常重要的参数。因此如何能够快速、可靠、准确地检测出粪大肠菌群含量对水质健康具有重要意义。
今天我们要讲的是通过光度法快速检测地表水中粪大肠菌群的操作方法，此方法原理是通过一定量的水样与选择性培养基混合均匀放置于44.5℃环境下，粪大肠菌群产生β-半乳糖苷酶，并分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，通过连续分光光度（波长：300nm～600nm）测定，依据待测水样色度变化与水中粪大肠菌群数成一定关系的原理，得出粪大肠菌群浓度。
水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释：制备水样10-1、10-2的稀释液，方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中，充分振荡使混合均匀，并使其中的细菌尽量呈单个存在，即为10-1稀释液；再从10-1制备10-2稀释液。以此类推，稀释到所需倍数。2、接种和培养：以无菌操作于5支三倍浓缩培养基（接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无气泡）中各加入水样10mL，5支普通培养基试管中加入水样1mL，5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL， 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察：37℃中培养24h后取出观察，观察有无气体（杜汉氏小管内有无气体）和酸产生（培养基有无变色）。在48h之间，培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累，或培养基颜色从紫色变为黄色，便可初步断定为阳性反应。
