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分光光度计的工作原理
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分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度;
I0为入射的单色光强度;
I 为透射的单色光强度;
T 为物质的透射率;
k 为摩尔吸收系数;
L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;
c 为物质的浓度;
使用分光光度计的注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
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分光光度计操作中故障及其排除方法1)仪器不能调零。可能原因:
a)光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。
b)透过率“”旋到底了。解决方法:重新调整“”旋钮。
c)仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥,并更换干燥剂。
d)电路故障。解决方法:送修理部门,检修电路。
2)仪器不能调“”。可能原因:
a)光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。
b)比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。
c)光电转换部分老化。解决方法:更换部件。
d)电路故障。解决方法:调修电路。
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