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三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫中央(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前一天的训练,一天2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
siRNA 的作用原理
利用短寡核苷酸 siRNA 或能够转录 siRNA 的 DNA 质粒将双链 RNA (dsRNA) 引入细胞。细胞中的 Dicer 蛋白将 dsRNA 消化为 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。 siRNA 被整合到 RNA 诱导沉默复合体 (RISC) 中。在 RISC 复合体中,dsRNA 发生链分离。其反义链与细胞中的互补/靶 mRNA 杂交。活化 RISC 中的核酸酶降解靶 mRNA。断裂的 mRNA 无法翻译成蛋白质。也就是说蛋白质无法表达,从而成功“敲除”蛋白质。
小鼠急性肺yan模型构建方法案例急性肺yan:
急性肺yan是指肺部发生急性的yan症反应,通常是由细菌、病毒或其他微生物gan染引起的。急性肺yan的主要症状包括发热、咳嗽、咳痰、胸痛和呼吸困难。急性肺yan的严重程度因人而异,有些人可以在家中服用抗sheng素或抗病毒yao物zhi疗,有些人则需要住院接受氧气zhi疗或人工呼吸器支持。急性肺yan如果不及时诊断和zhi疗,可能会导致呼吸衰竭、败xue症、心脏骤停或si亡。
实验材料
C57BL/6小鼠
LPS
方法步骤
1、小鼠禁食不禁水12h 。
2、使用戊ba比妥钠(30mg/kg)腹腔ma醉,固定于板上
3、使用10mg/ml(50ul/只)的给药剂量滴入小鼠咽喉壁,并捏住鼻子约20-30s后松开。
4、诱导后小鼠正常饲养观察。实验案例
给药2小时后,HE染色开始出现炎细胞浸润
6小时明显炎细胞浸润并肺泡壁增厚
12小时很少见到正常形态的肺泡结构
24小时肺泡壁明显增厚